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细胞转染技术的两个分类介绍

更新时间:2023-12-25  |  点击率:141
细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。
 
细胞转染是指将外源遗传物质(DNA或RNA)导入真核细胞的技术。细胞转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染。
 
瞬时转染:外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但持续时间只有几天(数天内大部分外源性 DNA 会在核酸酶作用下降解或被细胞分裂稀释,一周后便无法再检出)。使用超螺旋质粒 DNA 进行瞬时转染的效率高,因为其能被细胞更高效地摄取。
 
稳定转染:外源性DNA可以整合至细胞基因组中,或者作为游离型质粒存在,并可传递至转染细胞的子代。但通常只有单个或几个拷贝的外源性DNA整合至稳定转染基因组中,因此稳定转染基因的表达水平一般低于瞬时转染基因的表达水平。由于外源性DNA稳定整合至基因组的概率很低,因此通常在用于转染的DNA构建体中纳入可筛选标记物(如对各种筛选药物产生抗性的基因,或是可对待转染细胞系有缺陷的必需基因进行补偿的基因),然后在短暂的恢复期后对细胞施加适当的筛选压力。

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